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可分有性繁殖(种子繁殖)和无性繁殖(营养器官繁殖),而近来有不少种花卉已采用组织培养手段,这是一种新的常规繁殖方法。
有性繁殖 有性繁殖是通过有性过程得到种子,用种子繁殖新个体,这种新个体兼有父母本的性状。一部分异花授粉的花卉常常得到一些天然杂交种,从中可以选出一些新种,用种子繁殖,繁殖量大,方法简便,所得苗株根系完整,生长健壮,寿命长。种子易于携带、流通、保存和交换。这些都是种子繁殖的优点。但种子繁殖由于变异性大,往往不能保存其原有的优良性状,所以需要采用一些保持纯系的方法,主要是隔离栽培,每个变种的隔离至少远距2公里。近年来国际上对F1杂交第一代的花卉种子需求量很大,重要优质花坛花卉,基本上都出这种种子出售。
1、种子的采收、贮藏和处理
(1)留种母株选择 留种母株必须选择特别健壮、能体现品种特性而无病虫害的植株,为避免品种间机械的或生物的混杂,种植时在不同变种的植物之间要作必要的隔离,并经常进行严格的检查、鉴定,淘汰劣变植株。
(2 )种子采收 花卉种子的来收,要根据果实的开裂方式、种子的着生部位以及种子的成熟度等进行,如:某些种子应在充分成熟后来收;对于荚果、角果等易于开裂的花卉种类,宜在开裂前于清晨空气湿度较大时采收!对种子陆续成熟的花卉种类,宜分批采收;对种子不易散落的花卉种类,可以在整个植株全部成熟后,全株拔起晾干脱粒,脱粒后经干燥处理,使其含水量下降到一定标准后贮藏。
(3)种子贮藏 种子采收后,连株或连壳曝晒,或上面加以覆盖后曝晒,或在通风处阴干(不要直接曝晒种子),再去杂、去壳,清除各种附着物,然后妥善贮藏于密闭的容器中并存放在低温条件下,这样可以拘制其呼吸作用,降低能量消耗,保持活力。
(4)播种前的种子处理
①选种:在播种前首先要检查种子是否属所需要繁殖的植物,名称与实物是否一致,然后要选用粒大饱满而具有该种花卉种子应有的色泽和光泽的当年采摘者,隔年的陈种子如储藏不好,容易降低发芽率。
②种子处理:对硬粒种子或发芽缓慢的种子进行处埋,常用的方法有以下几种: a·浸种:播种前浸种有利于催芽,可在播种前用冲水或温水浸种,一般浸2~24小时,浸种时间与水温成反比,如兔子花、美人蕉都须进行浸种。 b·剥壳:在果壳坚硬成于枯的情况下, 必须将其剥脱后再播种,如黄花夹竹桃等。 c·挫伤:对种皮坚硬,透水性及透气性都较差,幼胚很难冲破种皮而发芽的种子,可在近种脐处将种皮略加挫伤,以利发芽,如紫藤、凤凰木等。 d·酸、碱处理:用强酸强碱如浓硫酸或苛性钠处理种子,可使坚硬种皮变软,处理时间从几分钟到几小时不等,视种皮的坚硬程度及透性强弱而异,浸种后必须角清水将种子洗净,方可播种。 e·冷藏或低温层积处理:常为打破种子休眠的一种办法。将种于在2~5℃的温度下处理2一3周,或在秋季用湿沙层积法处理种子,越过冬季后播种,可以打碗休眠,促进发芽。 f·拌种:主要用于一些细小的花卉种子。
2、播种时间 大致分为春播及秋播。木本及宿根花卉都在春季断霜后播种,也可提前在温室播种。一、二年生草花,北方都于早春(2~3月)在温室播种,中部地区对一年生草花春播,二年生者秋播;南方则对两者都以秋冬播为主,一年生者亦用春播。温室草花,根据需要开花期的前后而提早或延迟播种。
3.播种方法
(1)床播 ①苗床:露地播种前,先选择地势高燥、平坦、背风、向阳的地方设置苗床,土壤要疏松肥沃,既利于排水,又有一定的蓄水能力。经翻整后耙细、去除杂物,然后再整地筑畦,床宽一般为1.2米左右,床面必须整平。 ②播种:根据种类及种子大小,可采取点播、条播或撒播。点播也称穴播,用于大粒种子,以一定株行距开穴将种子播下,每穴2~4粒。条播用于一般的种类,在苗床上进行横条括。撒播则用于大量而较粗放的种类,将种子均匀地撒于床面。条播管理方便,通风透光好,有利生长;撤播出苗量大,占面积小 ,但在除草时费劳力较多。播种量依种子的发芽率、气候、上质及幼苗的生长速度而定。如温暖、土质肥沃、种子发芽率高、幼苗生长快,播种宜稀。播种深度,为种子直径的2~3倍。十分细小的种子,不必覆盖细上,只需覆草保湿。 ③镇压和覆盖:播种后将床面压实,使种子与土壤密切结合,便于种子从土壤中吸收水分而发芽。一般多用平板压紧,也有用木制滚筒滚压。苗床镇压后可覆草,以保持土壤水分,利于发芽,防止雨水冲刷,或浇灌时冲开覆盏细上,致使种子暴露而影响发芽,同时也可减少杂草生长。 ④浇水:镇压覆盖后,需立即浇水,特别是浸水处理过的种子,必须立即浇水,一般函地苗床细喷壶喷水,或自动喷雾机喷雾,使整个苗床吸透水。
(2)盆播 一般温室花卉种子、细小种子和珍贵种子,都用浅盆播种。通常用直径30厘米,深度为5厘米的播种盆或木箱,装好播种用培养土,将盆土压实,刮平上面。再将种子袋口张开,使种子徐徐均匀拉下,插好后视种子大刁、而覆一层薄薄的细上,用镇压板镇土,并用细眼喷壶喷水,或用浸水法将播种盆置于水槽中,下面垫一倒置空盆,水分由底部向上渗透,直浸至整个上面湿润为止。然后将盆面盖以玻璃,以减少水分蒸发,将盆置于阴处或于玻璃上盖报纸,待种子萌发。
(3)培养皿播种 花卉种于很多细小如粉未,在一般土壤中不易出苗,可用培养皿装细粒蛙石或珍珠岩加水湿润后播种,出苗较整齐。
4.播种后的管理 播种以后到出苗前后,土壤要保持湿润,给水要均匀,不可使苗床忽干忽湿,或过千过湿。要经常检查覆盖物是否完好,以防雨水冲刷床面。室内盆播加盖玻璃后,早晚宜将玻璃掀开数分钟,之通风透气,白天再盖好,防止蒸发。早春或冬季播种的,要给予底温。
种子发芽出上后,需立即除去覆盖物,务使其逐步见光,经过一段时间的锻炼后,才能完全暴露在阳光下。待真叶出现后,宜施淡肥一次。露地苗床幼苗过密,需即行间拔,将过密的、生长纤弱的拔去,使留下的苗能得到充足的阳光和养料。间拔后需立即浇水,使留下的幼苗根部不致因松动而死亡。诗幼苗长出4~5片真时时,进行移植,放大株行距。盆播幼苗出土后,需立即掀去玻璃,逐步见阳光。当长出1~2片真时时,即行移植,仍移植于浅播种盆内。
无性繁殖(营养器官繁殖) 利用植物的营养器官,通过扦插、分根、压条、嫁接等方法,使其成为一个新植株,称为无性繁殖。这种繁殖方法多用于雌雄蕊退化或固染色体倍数间题而不能结实的花卉种类,以及繁殖优良的园艺变种(不因有性繁殖而退化),还用于种子繁殖生长缓慢或到开花期时间太长的花卉种类。
1.杆插繁殖 扦插繁殖是花卉栽培中最常用的一种无性繁殖方法,有枝插(茎插)、叶插、根插等。扦插成活的原理是由于植物体的一部有再生作用,如枝条剪下插入士中,在其未端能生根,上部能发出新芽,再生成完整的植株。
支配植物再生作用的物质,主要有两种: 一为创伤激素,植物营养器官被切伤部分的死细胞和伤细胞的原生质,行分解作用而产生创伤激素,可促使这一部分的细胞分裂而发生新组织;二为植物体内芽及时柄等处产生的激素,这种内源激素也能促进植物的再生力。当插条切口受到上述两种激素的刺激后,在适宜的环境中,经过一定的时间,就会发生愈伤组织,其上又能发生新根。愈伤组织主要由切口形成层部分产生。也有的植物不发生愈伤组织而直接生根。故愈伤组织之多少,与生根并没有大多的直接关系。
(1)杆插季节 扦插的季节,依花卉种类、品种、气候及管理方法的不同可分为: ①休眠期扦插:即一些落叶花木的硬枝扦插。在秋冬季进入休眠以后,春发之前的11月或2、3月份均可进行。如月季、海仙花等。 ②生长期扦插:即一些木本花卉、温室花卉或草本花卉的嫩枝扦插,也称软枝扦插。全年均可扦插,长江流域在6月份以后采用成熟新枝(半硬枝)扦插,也属此类。扦插可在蔽荫情况下进行,或在全光照,不间歇或间歇喷雾下进行。如菊花、四季海棠等。
(2)杆插用的介质 ①园土:即普通的田间壤上,经过曝晒、敲松、耙细后即可待用,如一般地菊扦插的露地插床,多用这种园上。 ②扦插培养上:在园土内混以黄砂、泥炭、草木灰等,使之疏松,有利排水和插穗 的插入,如香石竹、象牙红的抒插多用这种混合土。 ③黄砂:即普通的河砂,中等粗细,这是一种优良的扦插介质,它排水良好、透气性好,如供水均匀,则易于生根。由于砂内无营养物质,生根后应立即移植。一般温室都备有沙床,可供一般温室植物随时扦插用。 ④腐殖质土:一般腐殖质土都为微酸性,通常用山泥做成插床,扦插喜酸植物,如山茶、杜鹃等。 ⑤蛭石:或珍珠岩,常和泥炭混和作抒插介质,效果良好。
(3)扦插方法 ①枝插 a.硬枝扦插 在落时后,选取成熟、节间短而粗壮,并且无病虫害的1~2年生枝条中部,剪成长度在10厘米左右,约3~4节的插穗,剪口要临节,下端平截,上端剪成40~50·斜面,以便排水水。插穗可埋藏于露地土中,干早春按一定株行距将插穗的2侣插入繁殖床,然后浇水。 b·半硬枝扦插:主要是常绿本本花卉的生长期扦插。取当年生的半成熟顶梢,长短为8厘米左右,剪下后将插穗下部的叶片摘去,仅留顶端2张叶片即可。插穗插入土中1/2至2/3,也可用短枝扦插。插穗未插前要放在阴处,用湿布覆盖或包好,以免水分蒸发而影响成活。 c·软枝扦插:即当年生嫩枝扦插,用于草本花卉或温室花卉。剪取枝条顶梢长约7~8厘米,只留先端2叶,作插穗,插入深约:1/3至1/2。如菊花、香石竹、瓜子海棠等。 ②芽插 不论半硬枝扦插或软枝扦插,如材料不够,可以取枝条上较成熟部分的芽,带叶片,带一段长约2厘米的枝条,作插穗,芽的对面略削去皮层,将插穗的枝条平插入土中,芽梢隐没于土中,叶片露出土面。 ③叶插 草本花卉可用叶插的种类较多,如虾蟆海棠、大岩桐、非洲紫罗兰等,它们多具有肥厚的叶片和叶柄。叶插发根的部位有时脉、叶缘及时柄之别。如虾姨海棠叶片插,将叶片上的支脉于近主脉处切断数处,平卧在插床面上,使时片和介质密切接触,并用何枝或铜红固定,就能在支脉切断处生根长芽。非洲紫罗兰叶插,能干叶柄切口处生根长芽。 ④根插 即用根作为插穗,适用范围,仅限于易从根部发生新梢的种类,如芍药、紫苑、凌霄、垂盆草等。芍药、凌霄等有粗大的根,可选其粗壮的,剪成5~10厘米左右一段作为插穗,全部埋人床内,或顶梢露出土面即可,垂盆草等细小的肉质草本植物之根,可以切成2厘米左右的小段,用撒播的方法撒于床面后覆土。
(4)杆插后的管理 扦插后的管理主要为浇水、遮荫。硬枝插及根插管理较为简单,北方要保护,预防受春寒之害。半硬枝及软枝插宜精细管理,保持床土湿润,以防止蒸发失水影响成活。扦插初期要注意蔽荫,发根时晨夕可逐渐通风透光,逐步减少灌水,增多日照。并要注吞拔草、除虫防病等工作,新芽长出后施淡肥一次。待植株壮实后方可移植。芽插、叶插多在温室内进行,也要精细管理,进行遮荫,以防止失水。
2、压条繁殖 是一种枝条不切离母体的抒插法,多用于扦插难以生根的花卉,或一些根孽丛主的灌木,如桂花、蜡梅、白兰花、结香、迎春、米兰等,在生长期进行压条。取条要根据压条方法而决定,如在植株基部堆土压条,大小部可用,就不必选条。一般要选用成熟而健壮的1~2年生枝条。曲枝压条要选择能弯曲、近地面的枝条。高空压条要选壮实的枝条,高低适当的部位。取条的数量,一般不超过母株枝条的1/2。
(1)压条方法 压条方法较多,主要有以下几种: ①单枝压条:取接近地面的枝条,作为压条材料,在压条部位的节下予以刻伤,或作环状剥皮,然后曲枝压入土中,枝条顶端露出地面,以竹钩固定,覆土10~20厘米并压紧。 ②堆土压条:堆土压条多用于根莱多的直立性的花灌木类,在丛生枝条的基部予以刻伤后堆土。生根后,分别移栽。 ③波状压条:用于枝条长而易弯曲的种类,将植株枝条弯曲牵引到地面,在枝条上切伤数处,每处都弯曲后埋入士中。生根后,分别切开移植即成为数个独立的新个体。 ④高空压条:高空压条多用于植株较直立,枝条较硬而不易弯曲,又不易发生根孽的种类。在其当年生的枝条中,选取成熟健壮、芽饱满的枝条进行环状剥皮,再用塑料薄膜包住环剥处,环剥的下部用绳扎紧,内填以水湿适度的苔薛拌土,然后将上口也扎紧。一个月左右生新根后剪下,将塑料薄膜解除,栽植后就成为一个独立的植株。
(2)压条后的管理 由于压条不脱离母体,在生根过程中的水分及养料均由母体供给,所以管理容易,但要注意是否压紧。切离母体的时间依其生根快慢而定。有些种类如蜡梅、桂花等需翌年切离;有些种类如月季等需当年切离。切离之后即可分株栽植,栽植时要尽量带土,以保护新根。
3.分株繁殖 分株繁殖多用于丛生型或容易萌发根莱的灌木或宿根类花卉。
(1)丛主型及萌渠类灌木的分株繁殖 一些丛生型的灌木花卉,在秋季或早春掘起株丛,一般可分2~3株种植,如蜡梅等。另一类是易于产生根孽的花卉,可将母株旁抽生的根孽(也称吸芽或吸枝等),带根割下来,另行种植,成为一个新植株,如木笔等。
(2)宿根类的分株繁殖 宿根植物地栽三、四年或盆栽二、三年后,丛株过大,需要重新种植或翻盆,都可以在春、秋两季结合分株进行。挖取或倒盆后,在根系自然分节处劈开,一般分成2~3丛,再单独种植或上盆,如鸢尾、春兰等。
(3)块根类的分株繁殖 花卉在根颈上萌发多个新芽,可将块根带芽分开另植,如大丽花等。
(4)根茎类的分株繁殖 用刀将根茎带芽(3~4芽)分割另植。
(5)分球繁遁 将球茎、鳞茎类花卉上的自然分生的小球进行分栽。分球繁殖的季节,根据挖球及种植的时间而定。在球根掘取后将大小球分开,置于通风处,使其经过休眠后再种植。
4、嫁接繁殖 嫁接是用植物营养器官的一部分,移接于其他植物体上。用于嫁接的枝条称接穗,所用的芽称接芽,被嫁接的植株称砧木,接活后的苗称为嫁按苗。嫁接繁殖是繁殖无性系优良品种的方法,常用于梅花、月季等。嫁接成活的原理,是具有亲和力的两株植物间在结合处的形成层,产生愈合现象,使导管、筛管互通,以形成一个新个体。
(1)嫁接时间 ①休眠期嫁接:一般在春季萌动前2~3星期,3月上、中旬,而有些萌动较早的种类在2月中、下旬。因此时砧木的根部及形成层已开始活动,而接穗的芽即将开始活动,嫁接成活率最高。秋季嫁接约在10月上旬至12月初,嫁接后使其先愈合,明春接穗再抽枝,故休眠期嫁接亦可分为春接和秋接。 ②生长期嫁接:在生长期进行的主要为芽接。多在树液流动旺盛之夏季进行,因此时枝条腋芽发育充实而饱满,而砧木树皮容易剥离。故7~8月是芽接最适期。因夏秋之际均可进行,亦称夏接。桃花、月季等多用芽接法。另外靠接因不切离母体,故也在生长期进行。
(2)砧木和接穗的选择 砧木要选择与接穗亲缘近、抗性强、生长壮健、适应本地环境的种类。接穗应选壮年的健康植株上的充实而饱满的枝条,取枝条的中部作为接穗。
(3)嫁接方法 嫁接的主要原则为切口必须平直光滑,如校条较硬,手持不稳,可用一块皮或厚帆布放在膝上,将待削的接穗平放,用快刀稳削,则削面平直,不致形成内凹。绑扎嫁接部分的材料,现在多用塑料薄膜剪成长条,既有弹性,又可防水。
嫁接的方法很多,主要有以下几种:
①切接:选定砧木,平截去上部,在其一侧纵向切下约2厘米左右,稍带木质部,露出形成层;接穗枝条的一端削成长2厘米左右的斜形,在其背侧未端斜削一切,插入砧木,对准形成层(对线),然后扎缚即可。
②劈接:也称割接,开花乔木的嫁接用此法较多。先在砧木离地10~12厘米左右处,截去上部,然后在砧木横切面中央,用嫁接刀垂直切下3厘米左右,然后剪取接穗,选取充实枝条,留2~3芽为一穗,将接穗的一端肖。成楔形,插入切好的砧木内,扎紧即可。
③靠接:将要选作接穗与砧木的两枝植株,置于一处,选取可以靠近的两根粗细相当的枝条,在能靠拢的部位,接穗与砧木都削去长约3~5厘米的一片,然后柏靠,对准形成层,使其削面密切结合并扎缚紧密。
④芽接:多用T字形芽接,即将枝条中部各饱满的侧芽,剪去叶片,保存叶柄,连同枝条的皮层削成芽片,长约2厘米,并稍带本质部(某些植物不带木质部,如月季)。群后将砧木的皮切一T字形,并用芽接刀将另一端薄片的皮层桃开,将芽片插入,用塑料簿膜带扎紧,将芽及叶柄露出。 组织培养 用组织培养的方法进行繁殖是一项先进技术,可用极少量的繁殖材料,繁殖大量的植株,并可得到去病毒的壮苗,这在某些花卉的商品生产中已成为极有效的繁殖手段。 组织培养早在20世纪初即已开始,已有80多年的历史。
近年发展很快,并广泛用于花卉登殖,现在由琼脂培养转向液体培养,即用发酵罐深层培养,形成微繁殖工业。目前又在研究人造种子,把用微繁殖技术形成的不定胚和芽条用球形胶囊包裹起来,形成人造种子。这种人造种子能在适宜条件下,生长发育成植物体。但这项技术还有很多问题需要进行研究。
1.培养基和培养条件
(1)培养基成分 培养基的成分主要包括无机盐类(分大量元素和微量元素)、有机物质(即维生素等)、车长调节物质以及碳源等四大类: ①无机盐类:植物所需的十大元素,除碳、氢、氧由水和空气中供给外,其他氮、磷、焊、硫、钙、镁、铁等七种均需加到培养基中;微量元素有硼、锰、锌、钥、钻、碘、铜等。 ②有机物质:主要是维生素和氨基酸,如民和民以及烟酸等。 ③生长调节质:主要有细胞分裂素和生长素两类。目前用得较多的细胞分裂素有:激动素、玉米素乃及异戊烯基腺嘌吟等,能促进芽的分化;生长素有吲跺乙酸、吲哚丁酸、萘乙酸,能促进生长。 ④碳源:因组织培养时植物体处于他养情况下,故必须有能源供给,主要是蔗糖。
(2)培养基的种类 培养基的种类很多,采用哪一种培养基,对于培养是否成功有很大的关系,在1950~19舰年初常采用White培养基,但后来有很多新的培养基,其中Ms是Murashige和skoog1962; ER是Erikssonl965; B5是Gambor等1968; SH是shenk和Hildebrandt l972; HE是Heller1953提出来的,见表1表2。 这些培养基中MS培养基应用最广泛。ER培养基与MS培养基相似。B5培养基在愈伤组织和悬浮培养方面做了不少试验,对有些植物很适合,SH培养基与B5相似。HE培养基为欧洲许多实验室所用,但矿物盐浓度稍低,应用范围不太广。在花卉组织培养中用MS培养基最多。
(3)引培养条件 培养条件,按培养对象的种类不同而有所不同,温度条件一般在23~26℃左右的恒温条件下。光照条件对器官形成有作用,一般范围是1000~3000勒克司,每日12~16小时,高于3000勒克司有强烈抑制作用。培养室要求清洁卫生,减少污染。
2.花卉组织培养的途径 在花卉组织培养实践中,用植物的组织或细胞培养成植株,也就是试管培养,可以通过三条途径。
(1)通过器官发生 通过由培养的组织,产生芽及根,器官发生由于培养材料的不同又可分为两方面:一是培养花卉植物的茎尖产生大量芽,再将芽分离转移培养成植株;二是培养花卉植物器官外植体产生不定芽,发育成植株。
(2)通过煎伤组织分化成株 将花卉植物体的一小片组织培养成愈伤组织,再诱导分化成芽和根,成为完整植株。
(3)通过胚状体发主 由培养的植株产生愈伤组织,再通过悬浮培养,或直接产生大量的胚状体,再发育成完整植株。
3.花卉组织墙养的操作方法 花卉组织培养的操作可分为培养基配制、消毒灭菌、接种、培养等几方面。
(1)培养墓配制 选定培养基以后,需把大量元素、微量元素、有机物都配成母液,扩大倍数为稀释液,贮存备用。使用时,根据所需配制的量,在稀释液中加一些肌醇、水解酪蛋白、蔗糖等,再加铁盐(需用乙二胺四乙酸二钠(Na2一EDTA)加硫酸亚铁配制成螫合铁)成营养液,然后吸取需用量,加入培养基中,再测其酸碱度(一般pH值在5.5~6.5之间即可),最后加琼脂煮沸后分装入三角瓶或试管中,封口待用。
(2)消毒灭菌 消毒灭菌非常重要,关系到组织培养的成败。污染的途径是器皿、用具、材料的带菌,以及接种室的空气、墙壁、地板等的不清洁,故必须针对所提及的几方面,进行严密的消毒灭菌。
①培养基消毒:将配制分装好培养基的三角瓶或其他容器放入高压灭菌锅中,在15磅/英寸2的压力下,经20分钟高压灭菌即可。
②器皿与用具的消毒:接种用具及玻璃器皿、洗涤材料用的无菌水,用牛皮纸包好后和培养基一起放在高压灭菌锅中消毒灭菌。
③接种室消毒:接种室的地面及墙壁,在接种前后均要用1 :50的新洁尔敏湿性消毒,每次接种前还要用紫外线灯照射消毒30~60分钟,并用70%的酒精,在室内喷雾,以净化空气,最后是超净台台面消毒,可用新洁尔敏擦袜及70%酒精消毒。
④材料处理及消毒:花卉组织培养取嫩茎、花托、叶柄、叶片均可,取得材料后,需先清理,去掉多余部分,然后冲洗、洗涤剂洗涤、漂清后放入接种室或超净台上,用70%的酒精浸泡半分钟,进行表面消毒,再在10%的漂粉溶液中消毒10分钟左右,取出后用无菌水冲洗4~5次,即可接种。一般材料的选择以幼嫩部分为好。草花用嫩茎、花托为好;球根花卉用茎顶、鳞茎盘、鳞叶等为好。
(3)接种 接种用的钳子、解剖刀、接种针等均需在火焰上消毒后用,用后再消毒。将消毒好的材料置于培养皿中,用解剖刀切去其边缘,再切成小块接种在培养基上,使组织块与培养基密合,不得将材料陷于培养基中,接好后随即将瓶口封好待培养。
(4)培养 接种完毕后即可置于培养室,在恒温、加光条件下进行培养,培养一段时间后,根据情况将材料从诱导愈伤组织的培养基转到分化培养基(也有只用一种培养基就可直接诱导分化成绿苗的),最后转移到生根培养基上。
(5)试管苗移栽 试管苗发根后,必须随即转移到栽培基质中去,这种基质可以用培养土、蛭石、珍珠岩等配成。将试管苗从瓶中耿出,洗去残存的培养基,移植到准备好的基质中去,随即用细喷壶喷水后加玻璃或塑料罩,3~4日内不必浇水,以后浇些清水,1周后见苗已挺直,可去罩浇培养液(过去所用培养基的大量及微量元素减半配成),以利生长,2~4周后可进行常规栽培。 花卉繁殖,可分有性繁殖(种子繁殖)和无性繁殖(营养器官繁殖),而近来有不少种花卉已采用组织培养手段,这是一种新的常规繁殖方法。
有性繁殖 有性繁殖是通过有性过程得到种子,用种子繁殖新个体,这种新个体兼有父母本的性状。一部分异花授粉的花卉常常得到一些天然杂交种,从中可以选出一些新种,用种子繁殖,繁殖量大,方法简便,所得苗株根系完整,生长健壮,寿命长。种子易于携带、流通、保存和交换。这些都是种子繁殖的优点。但种子繁殖由于变异性大,往往不能保存其原有的优良性状,所以需要采用一些保持纯系的方法,主要是隔离栽培,每个变种的隔离至少远距2公里。近年来国际上对F1杂交第一代的花卉种子需求量很大,重要优质花坛花卉,基本上都出这种种子出售。
1、种子的采收、贮藏和处理
(1)留种母株选择 留种母株必须选择特别健壮、能体现品种特性而无病虫害的植株,为避免品种间机械的或生物的混杂,种植时在不同变种的植物之间要作必要的隔离,并经常进行严格的检查、鉴定,淘汰劣变植株。
(2)种子采收 花卉种子的来收,要根据果实的开裂方式、种子的着生部位以及种子的成熟度等进行,如:某些种子应在充分成熟后来收;对于荚果、角果等易于开裂的花卉种类,宜在开裂前于清晨空气湿度较大时采收!对种子陆续成熟的花卉种类,宜分批采收;对种子不易散落的花卉种类,可以在整个植株全部成熟后,全株拔起晾干脱粒,脱粒后经干燥处理,使其含水量下降到一定标准后贮藏。
(3)种子贮藏 种子采收后,连株或连壳曝晒,或上面加以覆盖后曝晒,或在通风处阴干(不要直接曝晒种子),再去杂、去壳,清除各种附着物,然后妥善贮藏于密闭的容器中并存放在低温条件下,这样可以拘制其呼吸作用,降低能量消耗,保持活力。
(4)播种前的种子处理
①选种:在播种前首先要检查种子是否属所需要繁殖的植物,名称与实物是否一致,然后要选用粒大饱满而具有该种花卉种子应有的色泽和光泽的当年采摘者,隔年的陈种子如储藏不好,容易降低发芽率。
②种子处理:对硬粒种子或发芽缓慢的种子进行处埋,常用的方法有以下几种: a·浸种:播种前浸种有利于催芽,可在播种前用冲水或温水浸种,一般浸2~24小时,浸种时间与水温成反比,如兔子花、美人蕉都须进行浸种。 b·剥壳:在果壳坚硬成于枯的情况下, 必须将其剥脱后再播种,如黄花夹竹桃等。 c·挫伤:对种皮坚硬,透水性及透气性都较差,幼胚很难冲破种皮而发芽的种子,可在近种脐处将种皮略加挫伤,以利发芽,如紫藤、凤凰木等。 d·酸、碱处理:用强酸强碱如浓硫酸或苛性钠处理种子,可使坚硬种皮变软,处理时间从几分钟到几小时不等,视种皮的坚硬程度及透性强弱而异,浸种后必须角清水将种子洗净,方可播种。 e·冷藏或低温层积处理:常为打破种子休眠的一种办法。将种于在2~5℃的温度下处理2一3周,或在秋季用湿沙层积法处理种子,越过冬季后播种,可以打碗休眠,促进发芽。 f·拌种:主要用于一些细小的花卉种子。
2、播种时间 大致分为春播及秋播。木本及宿根花卉都在春季断霜后播种,也可提前在温室播种。一、二年生草花,北方都于早春(2~3月)在温室播种,中部地区对一年生草花春播,二年生者秋播;南方则对两者都以秋冬播为主,一年生者亦用春播。温室草花,根据需要开花期的前后而提早或延迟播种。
3.播种方法
(1)床播 ①苗床:露地播种前,先选择地势高燥、平坦、背风、向阳的地方设置苗床,土壤要疏松肥沃,既利于排水,又有一定的蓄水能力。经翻整后耙细、去除杂物,然后再整地筑畦,床宽一般为1.2米左右,床面必须整平。 ②播种:根据种类及种子大小,可采取点播、条播或撒播。点播也称穴播,用于大粒种子,以一定株行距开穴将种子播下,每穴2~4粒。条播用于一般的种类,在苗床上进行横条括。撒播则用于大量而较粗放的种类,将种子均匀地撒于床面。条播管理方便,通风透光好,有利生长;撤播出苗量大,占面积小 ,但在除草时费劳力较多。播种量依种子的发芽率、气候、上质及幼苗的生长速度而定。如温暖、土质肥沃、种子发芽率高、幼苗生长快,播种宜稀。播种深度,为种子直径的2~3倍。十分细小的种子,不必覆盖细上,只需覆草保湿。 ③镇压和覆盖:播种后将床面压实,使种子与土壤密切结合,便于种子从土壤中吸收水分而发芽。一般多用平板压紧,也有用木制滚筒滚压。苗床镇压后可覆草,以保持土壤水分,利于发芽,防止雨水冲刷,或浇灌时冲开覆盏细上,致使种子暴露而影响发芽,同时也可减少杂草生长。 ④浇水:镇压覆盖后,需立即浇水,特别是浸水处理过的种子,必须立即浇水,一般函地苗床细喷壶喷水,或自动喷雾机喷雾,使整个苗床吸透水。
(2)盆播 一般温室花卉种子、细小种子和珍贵种子,都用浅盆播种。通常用直径30厘米,深度为5厘米的播种盆或木箱,装好播种用培养土,将盆土压实,刮平上面。再将种子袋口张开,使种子徐徐均匀拉下,插好后视种子大刁、而覆一层薄薄的细上,用镇压板镇土,并用细眼喷壶喷水,或用浸水法将播种盆置于水槽中,下面垫一倒置空盆,水分由底部向上渗透,直浸至整个上面湿润为止。然后将盆面盖以玻璃,以减少水分蒸发,将盆置于阴处或于玻璃上盖报纸,待种子萌发。
(3)培养皿播种 花卉种于很多细小如粉未,在一般土壤中不易出苗,可用培养皿装细粒蛙石或珍珠岩加水湿润后播种,出苗较整齐。
4.播种后的管理 播种以后到出苗前后,土壤要保持湿润,给水要均匀,不可使苗床忽干忽湿,或过千过湿。要经常检查覆盖物是否完好,以防雨水冲刷床面。室内盆播加盖玻璃后,早晚宜将玻璃掀开数分钟,之通风透气,白天再盖好,防止蒸发。早春或冬季播种的,要给予底温。 种子发芽出上后,需立即除去覆盖物,务使其逐步见光,经过一段时间的锻炼后,才能完全暴露在阳光下。待真叶出现后,宜施淡肥一次。露地苗床幼苗过密,需即行间拔,将过密的、生长纤弱的拔去,使留下的苗能得到充足的阳光和养料。间拔后需立即浇水,使留下的幼苗根部不致因松动而死亡。诗幼苗长出4~5片真时时,进行移植,放大株行距。盆播幼苗出土后,需立即掀去玻璃,逐步见阳光。当长出1~2片真时时,即行移植,仍移植于浅播种盆内。
无性繁殖(营养器官繁殖) 利用植物的营养器官,通过扦插、分根、压条、嫁接等方法,使其成为一个新植株,称为无性繁殖。这种繁殖方法多用于雌雄蕊退化或固染色体倍数间题而不能结实的花卉种类,以及繁殖优良的园艺变种(不因有性繁殖而退化),还用于种子繁殖生长缓慢或到开花期时间太长的花卉种类。
1.杆插繁殖 扦插繁殖是花卉栽培中最常用的一种无性繁殖方法,有枝插(茎插)、叶插、根插等。扦插成活的原理是由于植物体的一部有再生作用,如枝条剪下插入士中,在其未端能生根,上部能发出新芽,再生成完整的植株。
支配植物再生作用的物质,主要有两种: 一为创伤激素,植物营养器官被切伤部分的死细胞和伤细胞的原生质,行分解作用而产生创伤激素,可促使这一部分的细胞分裂而发生新组织;二为植物体内芽及时柄等处产生的激素,这种内源激素也能促进植物的再生力。当插条切口受到上述两种激素的刺激后,在适宜的环境中,经过一定的时间,就会发生愈伤组织,其上又能发生新根。愈伤组织主要由切口形成层部分产生。也有的植物不发生愈伤组织而直接生根。故愈伤组织之多少,与生根并没有大多的直接关系。
(1)杆插季节 扦插的季节,依花卉种类、品种、气候及管理方法的不同可分为: ①休眠期扦插:即一些落叶花木的硬枝扦插。在秋冬季进入休眠以后,春发之前的11月或2、3月份均可进行。如月季、海仙花等。 ②生长期扦插:即一些木本花卉、温室花卉或草本花卉的嫩枝扦插,也称软枝扦插。全年均可扦插,长江流域在6月份以后采用成熟新枝(半硬枝)扦插,也属此类。扦插可在蔽荫情况下进行,或在全光照,不间歇或间歇喷雾下进行。如菊花、四季海棠等。
(2)杆插用的介质 ①园土:即普通的田间壤上,经过曝晒、敲松、耙细后即可待用,如一般地菊扦插的露地插床,多用这种园上。 ②扦插培养上:在园土内混以黄砂、泥炭、草木灰等,使之疏松,有利排水和插穗 的插入,如香石竹、象牙红的抒插多用这种混合土。 ③黄砂:即普通的河砂,中等粗细,这是一种优良的扦插介质,它排水良好、透气性好,如供水均匀,则易于生根。由于砂内无营养物质,生根后应立即移植。一般温室都备有沙床,可供一般温室植物随时扦插用。 ④腐殖质土:一般腐殖质土都为微酸性,通常用山泥做成插床,扦插喜酸植物,如山茶、杜鹃等。 ⑤蛭石:或珍珠岩,常和泥炭混和作抒插介质,效果良好。
(3)扦插方法 ①枝插 a.硬枝扦插 在落时后,选取成熟、节间短而粗壮,并且无病虫害的1~2年生枝条中部,剪成长度在10厘米左右,约3~4节的插穗,剪口要临节,下端平截,上端剪成40~50·斜面,以便排水水。插穗可埋藏于露地土中,干早春按一定株行距将插穗的2侣插入繁殖床,然后浇水。 b·半硬枝扦插:主要是常绿本本花卉的生长期扦插。取当年生的半成熟顶梢,长短为8厘米左右,剪下后将插穗下部的叶片摘去,仅留顶端2张叶片即可。插穗插入土中1/2至2/3,也可用短枝扦插。插穗未插前要放在阴处,用湿布覆盖或包好,以免水分蒸发而影响成活。 c·软枝扦插:即当年生嫩枝扦插,用于草本花卉或温室花卉。剪取枝条顶梢长约7~8厘米,只留先端2叶,作插穗,插入深约:1/3至1/2。如菊花、香石竹、瓜子海棠等。 ②芽插 不论半硬枝扦插或软枝扦插,如材料不够,可以取枝条上较成熟部分的芽,带叶片,带一段长约2厘米的枝条,作插穗,芽的对面略削去皮层,将插穗的枝条平插入土中,芽梢隐没于土中,叶片露出土面。 ③叶插 草本花卉可用叶插的种类较多,如虾蟆海棠、大岩桐、非洲紫罗兰等,它们多具有肥厚的叶片和叶柄。叶插发根的部位有时脉、叶缘及时柄之别。如虾姨海棠叶片插,将叶片上的支脉于近主脉处切断数处,平卧在插床面上,使时片和介质密切接触,并用何枝或铜红固定,就能在支脉切断处生根长芽。非洲紫罗兰叶插,能干叶柄切口处生根长芽。 ④根插 即用根作为插穗,适用范围,仅限于易从根部发生新梢的种类,如芍药、紫苑、凌霄、垂盆草等。芍药、凌霄等有粗大的根,可选其粗壮的,剪成5~10厘米左右一段作为插穗,全部埋人床内,或顶梢露出土面即可,垂盆草等细小的肉质草本植物之根,可以切成2厘米左右的小段,用撒播的方法撒于床面后覆土。
(4)杆插后的管理 扦插后的管理主要为浇水、遮荫。硬枝插及根插管理较为简单,北方要保护,预防受春寒之害。半硬枝及软枝插宜精细管理,保持床土湿润,以防止蒸发失水影响成活。扦插初期要注意蔽荫,发根时晨夕可逐渐通风透光,逐步减少灌水,增多日照。并要注吞拔草、除虫防病等工作,新芽长出后施淡肥一次。待植株壮实后方可移植。芽插、叶插多在温室内进行,也要精细管理,进行遮荫,以防止失水。
2、压条繁殖 是一种枝条不切离母体的抒插法,多用于扦插难以生根的花卉,或一些根孽丛主的灌木,如桂花、蜡梅、白兰花、结香、迎春、米兰等,在生长期进行压条。取条要根据压条方法而决定,如在植株基部堆土压条,大小部可用,就不必选条。一般要选用成熟而健壮的1~2年生枝条。曲枝压条要选择能弯曲、近地面的枝条。高空压条要选壮实的枝条,高低适当的部位。取条的数量,一般不超过母株枝条的1/2。
(1)压条方法 压条方法较多,主要有以下几种: ①单枝压条:取接近地面的枝条,作为压条材料,在压条部位的节下予以刻伤,或作环状剥皮,然后曲枝压入土中,枝条顶端露出地面,以竹钩固定,覆土10~20厘米并压紧。 ②堆土压条:堆土压条多用于根莱多的直立性的花灌木类,在丛生枝条的基部予以刻伤后堆土。生根后,分别移栽。 ③波状压条:用于枝条长而易弯曲的种类,将植株枝条弯曲牵引到地面,在枝条上切伤数处,每处都弯曲后埋入士中。生根后,分别切开移植即成为数个独立的新个体。 ④高空压条:高空压条多用于植株较直立,枝条较硬而不易弯曲,又不易发生根孽的种类。在其当年生的枝条中,选取成熟健壮、芽饱满的枝条进行环状剥皮,再用塑料薄膜包住环剥处,环剥的下部用绳扎紧,内填以水湿适度的苔薛拌土,然后将上口也扎紧。一个月左右生新根后剪下,将塑料薄膜解除,栽植后就成为一个独立的植株。
(2)压条后的管理 由于压条不脱离母体,在生根过程中的水分及养料均由母体供给,所以管理容易,但要注意是否压紧。切离母体的时间依其生根快慢而定。有些种类如蜡梅、桂花等需翌年切离;有些种类如月季等需当年切离。切离之后即可分株栽植,栽植时要尽量带土,以保护新根。
3.分株繁殖 分株繁殖多用于丛生型或容易萌发根莱的灌木或宿根类花卉。
(1)丛主型及萌渠类灌木的分株繁殖 一些丛生型的灌木花卉,在秋季或早春掘起株丛,一般可分2~3株种植,如蜡梅等。另一类是易于产生根孽的花卉,可将母株旁抽生的根孽(也称吸芽或吸枝等),带根割下来,另行种植,成为一个新植株,如木笔等。
(2)宿根类的分株繁殖 宿根植物地栽三、四年或盆栽二、三年后,丛株过大,需要重新种植或翻盆,都可以在春、秋两季结合分株进行。挖取或倒盆后,在根系自然分节处劈开,一般分成2~3丛,再单独种植或上盆,如鸢尾、春兰等。
(3)块根类的分株繁殖 花卉在根颈上萌发多个新芽,可将块根带芽分开另植,如大丽花等。
(4)根茎类的分株繁殖 用刀将根茎带芽(3~4芽)分割另植。
(5)分球繁遁 将球茎、鳞茎类花卉上的自然分生的小球进行分栽。分球繁殖的季节,根据挖球及种植的时间而定。在球根掘取后将大小球分开,置于通风处,使其经过休眠后再种植。
4、嫁接繁殖 嫁接是用植物营养器官的一部分,移接于其他植物体上。用于嫁接的枝条称接穗,所用的芽称接芽,被嫁接的植株称砧木,接活后的苗称为嫁按苗。嫁接繁殖是繁殖无性系优良品种的方法,常用于梅花、月季等。嫁接成活的原理,是具有亲和力的两株植物间在结合处的形成层,产生愈合现象,使导管、筛管互通,以形成一个新个体。
(1)嫁接时间 ①休眠期嫁接:一般在春季萌动前2~3星期,3月上、中旬,而有些萌动较早的种类在2月中、下旬。因此时砧木的根部及形成层已开始活动,而接穗的芽即将开始活动,嫁接成活率最高。秋季嫁接约在10月上旬至12月初,嫁接后使其先愈合,明春接穗再抽枝,故休眠期嫁接亦可分为春接和秋接。 ②生长期嫁接:在生长期进行的主要为芽接。多在树液流动旺盛之夏季进行,因此时枝条腋芽发育充实而饱满,而砧木树皮容易剥离。故7~8月是芽接最适期。因夏秋之际均可进行,亦称夏接。桃花、月季等多用芽接法。另外靠接因不切离母体,故也在生长期进行。
(2)砧木和接穗的选择 砧木要选择与接穗亲缘近、抗性强、生长壮健、适应本地环境的种类。接穗应选壮年的健康植株上的充实而饱满的枝条,取枝条的中部作为接穗。
(3)嫁接方法 嫁接的主要原则为切口必须平直光滑,如校条较硬,手持不稳,可用一块皮或厚帆布放在膝上,将待削的接穗平放,用快刀稳削,则削面平直,不致形成内凹。绑扎嫁接部分的材料,现在多用塑料薄膜剪成长条,既有弹性,又可防水。
嫁接的方法很多,主要有以下几种: ①切接:选定砧木,平截去上部,在其一侧纵向切下约2厘米左右,稍带木质部,露出形成层;接穗枝条的一端削成长2厘米左右的斜形,在其背侧未端斜削一切,插入砧木,对准形成层(对线),然后扎缚即可。 ②劈接:也称割接,开花乔木的嫁接用此法较多。先在砧木离地10~12厘米左右处,截去上部,然后在砧木横切面中央,用嫁接刀垂直切下3厘米左右,然后剪取接穗,选取充实枝条,留2~3芽为一穗,将接穗的一端肖。成楔形,插入切好的砧木内,扎紧即可。 ③靠接:将要选作接穗与砧木的两枝植株,置于一处,选取可以靠近的两根粗细相当的枝条,在能靠拢的部位,接穗与砧木都削去长约3~5厘米的一片,然后柏靠,对准形成层,使其削面密切结合并扎缚紧密。 ④芽接:多用T字形芽接,即将枝条中部各饱满的侧芽,剪去叶片,保存叶柄,连同枝条的皮层削成芽片,长约2厘米,并稍带本质部(某些植物不带木质部,如月季)。群后将砧木的皮切一T字形,并用芽接刀将另一端薄片的皮层桃开,将芽片插入,用塑料簿膜带扎紧,将芽及叶柄露出。
组织培养 用组织培养的方法进行繁殖是一项先进技术,可用极少量的繁殖材料,繁殖大量的植株,并可得到去病毒的壮苗,这在某些花卉的商品生产中已成为极有效的繁殖手段。 组织培养早在20世纪初即已开始,已有80多年的历史。近年发展很快,并广泛用于花卉登殖,现在由琼脂培养转向液体培养,即用发酵罐深层培养,形成微繁殖工业。
目前又在研究人造种子,把用微繁殖技术形成的不定胚和芽条用球形胶囊包裹起来,形成人造种子。这种人造种子能在适宜条件下,生长发育成植物体。但这项技术还有很多问题需要进行研究。
1.培养基和培养条件
(1)培养基成分 培养基的成分主要包括无机盐类(分大量元素和微量元素)、有机物质(即维生素等)、车长调节物质以及碳源等四大类: ①无机盐类:植物所需的十大元素,除碳、氢、氧由水和空气中供给外,其他氮、磷、焊、硫、钙、镁、铁等七种均需加到培养基中;微量元素有硼、锰、锌、钥、钻、碘、铜等。 ②有机物质:主要是维生素和氨基酸,如民和民以及烟酸等。 ③生长调节质:主要有细胞分裂素和生长素两类。目前用得较多的细胞分裂素有:激动素、玉米素乃及异戊烯基腺嘌吟等,能促进芽的分化;生长素有吲跺乙酸、吲哚丁酸、萘乙酸,能促进生长。 ④碳源:因组织培养时植物体处于他养情况下,故必须有能源供给,主要是蔗糖。
(2)培养基的种类 培养基的种类很多,采用哪一种培养基,对于培养是否成功有很大的关系,在1950~19舰年初常采用White培养基,但后来有很多新的培养基,其中Ms是Murashige和skoog1962; ER是Erikssonl965; B5是Gambor等1968; SH是shenk和Hildebrandt l972; HE是Heller1953提出来的,见表1表2。 这些培养基中MS培养基应用最广泛。ER培养基与MS培养基相似。B5培养基在愈伤组织和悬浮培养方面做了不少试验,对有些植物很适合,SH培养基与B5相似。HE培养基为欧洲许多实验室所用,但矿物盐浓度稍低,应用范围不太广。在花卉组织培养中用MS培养基最多。
(3)引培养条件 培养条件,按培养对象的种类不同而有所不同,温度条件一般在23~26℃左右的恒温条件下。光照条件对器官形成有作用,一般范围是1000~3000勒克司,每日12~16小时,高于3000勒克司有强烈抑制作用。培养室要求清洁卫生,减少污染。
2.花卉组织培养的途径 在花卉组织培养实践中,用植物的组织或细胞培养成植株,也就是试管培养,可以通过三条途径。
(1)通过器官发生 通过由培养的组织,产生芽及根,器官发生由于培养材料的不同又可分为两方面:一是培养花卉植物的茎尖产生大量芽,再将芽分离转移培养成植株;二是培养花卉植物器官外植体产生不定芽,发育成植株。
(2)通过煎伤组织分化成株 将花卉植物体的一小片组织培养成愈伤组织,再诱导分化成芽和根,成为完整植株。
(3)通过胚状体发主 由培养的植株产生愈伤组织,再通过悬浮培养,或直接产生大量的胚状体,再发育成完整植株。
3.花卉组织墙养的操作方法 花卉组织培养的操作可分为培养基配制、消毒灭菌、接种、培养等几方面。
(1)培养墓配制 选定培养基以后,需把大量元素、微量元素、有机物都配成母液,扩大倍数为稀释液,贮存备用。使用时,根据所需配制的量,在稀释液中加一些肌醇、水解酪蛋白、蔗糖等,再加铁盐(需用乙二胺四乙酸二钠(Na2一EDTA)加硫酸亚铁配制成螫合铁)成营养液,然后吸取需用量,加入培养基中,再测其酸碱度(一般pH值在5.5~6.5之间即可),最后加琼脂煮沸后分装入三角瓶或试管中,封口待用。
(2)消毒灭菌 消毒灭菌非常重要,关系到组织培养的成败。污染的途径是器皿、用具、材料的带菌,以及接种室的空气、墙壁、地板等的不清洁,故必须针对所提及的几方面,进行严密的消毒灭菌。
①培养基消毒:将配制分装好培养基的三角瓶或其他容器放入高压灭菌锅中,在15磅/英寸2的压力下,经20分钟高压灭菌即可。
②器皿与用具的消毒:接种用具及玻璃器皿、洗涤材料用的无菌水,用牛皮纸包好后和培养基一起放在高压灭菌锅中消毒灭菌。
③接种室消毒:接种室的地面及墙壁,在接种前后均要用1 :50的新洁尔敏湿性消毒,每次接种前还要用紫外线灯照射消毒30~60分钟,并用70%的酒精,在室内喷雾,以净化空气,最后是超净台台面消毒,可用新洁尔敏擦袜及70%酒精消毒。
④材料处理及消毒:花卉组织培养取嫩茎、花托、叶柄、叶片均可,取得材料后,需先清理,去掉多余部分,然后冲洗、洗涤剂洗涤、漂清后放入接种室或超净台上,用70%的酒精浸泡半分钟,进行表面消毒,再在10%的漂粉溶液中消毒10分钟左右,取出后用无菌水冲洗4~5次,即可接种。一般材料的选择以幼嫩部分为好。草花用嫩茎、花托为好;球根花卉用茎顶、鳞茎盘、鳞叶等为好。
(3)接种 接种用的钳子、解剖刀、接种针等均需在火焰上消毒后用,用后再消毒。将消毒好的材料置于培养皿中,用解剖刀切去其边缘,再切成小块接种在培养基上,使组织块与培养基密合,不得将材料陷于培养基中,接好后随即将瓶口封好待培养。
(4)培养 接种完毕后即可置于培养室,在恒温、加光条件下进行培养,培养一段时间后,根据情况将材料从诱导愈伤组织的培养基转到分化培养基(也有只用一种培养基就可直接诱导分化成绿苗的),最后转移到生根培养基上。
(5)试管苗移栽 试管苗发根后,必须随即转移到栽培基质中去,这种基质可以用培养土、蛭石、珍珠岩等配成。将试管苗从瓶中耿出,洗去残存的培养基,移植到准备好的基质中去,随即用细喷壶喷水后加玻璃或塑料罩,3~4日内不必浇水,以后浇些清水,1周后见苗已挺直,可去罩浇培养液(过去所用培养基的大量及微量元素减半配成),以利生长,2~4周后可进行常规栽培。
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