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对硫磷为无色无臭的液体,是广谱性杀虫剂,具有触杀、胃毒、熏蒸的作用,但是如果人吸入或食入,会导致中毒,严重的会导致死亡。近日,华中农业大学食品科技学院研究人员发表论文,旨在合成免疫原性较强的人工抗原,为制备对硫磷单克隆抗体和建立免疫快速检测食品中农药残留方法奠定基础。
研究指出,成功合成2种对硫磷完全抗原,免疫Balb/c小鼠PA-2-BSA组免疫应答效果好于PA-1-BSA组。该文发表在2013年第01期《解放军预防医学杂志》上。
选用2种方法合成羧基化对硫磷:一种以对硫磷为原料,改造硝基一端;另一种以三氯硫磷为原料,改造磷硫键一端。EDC法偶联牛血清白蛋白(BSA)制备免疫原(PA-1-BSA和PA-2-BSA),并分别免疫Balb/c小鼠。间接ELISA测定抗血清效价,竞争ELISA测定检测灵敏度,比较免疫效果。
SDS-PAGE电泳表明,2种完全抗原均合成成功;质谱法鉴定免疫原的偶联比分别为:N(PA-1/BSA)=7.2,N(PA-2/BSA)=15.4;小鼠抗血清经间接ELISA检测表明,PA-2-BSA组效价明显高于PA-1-BSA组;间接竞争ELISA检测表明,PA-2-BSA组半数抑制浓度(IC50)为1μg/ml,明显优于PA-1-BSA组(IC50为>100μg/ml)。
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