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猪的人工授精实验室要求干净清洁,操作台清洁干燥,并安装空调,将温度控制在24-26℃之间。
配制稀释液。准确称量好BTS稀释粉(葡萄糖37.15g、柠檬酸钠6g、EDTA钠盐1.25g、碳酸氢钠1.25g、青霉素钠0.5g、硫酸链霉素1g)或Gueiph稀释粉,加入500ml的双蒸水,充分搅拌,使其完全溶解,然后加入双蒸水至1000毫升,放在35oC的恒温水浴箱里保存待用。
将准备使用的移液管、玻璃棒、载玻片、盖玻片放入35℃恒温容器,开启好显微镜、恒温加热板。
精液送达后先观察精液的颜色、嗅其气味,正常的精液呈乳白色或灰白色,略带腥味,如呈灰黄色或血色带尿臊味应弃掉。
用量筒或电子称测量好采精量,并做好记录,将精液放待分装稀释的容器里置于35℃的恒温水浴箱里待检。
先用200倍的显微镜观察精子的活力,做出初步评定,精子的活力不能低于0.8才可使用。
用比色计或精子计数器计算出每毫升原精液所含的精子数,再计算出总的精子数。例如:采精量为200ml,每毫升2.3亿个精子,总精子数为460亿,每份稀释好的精液按80毫升30亿个精子计算,可生产15头份的稀释精液,加入1000ml的稀释液即可。
确定好所需稀释的倍数后,先按1∶1的比例用玻璃棒引流向原精液容器中缓缓地加入稀释液,轻轻搅拌10分钟-15分钟,观察加入稀释液后精子的活力是否受影响。然后按相同的方法加入所需的稀释液,待搅拌均匀后,分装(输精袋、瓶),置常温下约1小时后用毛巾包好放入17℃恒温冰箱里保存待用。
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